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梯度基因擴增儀(HN-SP96G)工作原理

更新時間:2024-05-20瀏覽:553次

梯度基因擴增儀(HN-SP96G)擴增儀的工作原理:

梯度基因擴增儀(HN-SP96G)的工作原理主要基于聚合酶鏈式反應(PCR)技術,通過循環變性-退火-延伸三個基本步驟,實現DNA片段的體外擴增。具體過程如下:


  1. 變性:DNA雙鏈在93℃左右的高溫下解離成單鏈,以便與引物結合。

  2. 退火:溫度降至55℃左右時,引物與DNA單鏈的互補序列配對結合。

  3. 延伸:在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈。

通過不斷循環這三個步驟(通常每完成一輪循環需2~4分鐘),可以獲得大量的DNA擴增產物。理論上,經過25~30輪循環后,基因可擴增10^9倍以上,實際上一般可達10^6~10^7倍。


基因測序儀的工作原理:

測序儀的工作原理主要基于特定的測序技術,如Sanger雙脫氧鏈末端終止法。以下是其工作原理的簡要概述:

  1. DNA片段制備:首先,需要將要測序的DNA片段進行特定的處理和準備。

  2. 測序反應:在測序反應中,利用特定的測序引物和DNA聚合酶,同時加入四種脫氧核苷酸(dATP、dTTP、dCTP、dGTP)和一種雙脫氧核苷酸(ddNTP)。雙脫氧核苷酸在合成中會隨機終止DNA鏈的延伸,形成不同長度的DNA片段。

  3. 電泳分離:通過變性聚丙烯酰胺凝膠電泳對這些不同長度的DNA片段進行分離。

  4. 檢測和讀數:最后,通過特定的檢測設備(如激光掃描儀)檢測分離后的DNA片段,并根據片段的長度和順序,讀出DNA的序列。


需要注意的是,隨著技術的進步,目前已經有更高效的測序技術,如高通量測序技術(也稱為下一代測序技術),其工作原理可能有所不同,但基本原理仍然是通過檢測DNA片段的序列來確定整個DNA分子的序列。

總的來說,擴增儀和測序儀都是生物實驗室中重要的工具,它們在分子生物學、醫學診斷、法醫學鑒定、農業生物技術等領域有著廣泛的應用。